液相悬浮芯片应用

Luminex液相悬浮芯片是基于高通量微孔板的多重检测抗体芯片技术。其基本原理是将高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上，将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。在检测时，一束激光照射磁珠上的荧光，识别磁珠标记的捕获抗体，从而获知该磁珠可检测哪种细胞因子，从而实现“定性”作用。进一步，通过加入生物素标记的高亲和配对检测抗体，同步识别磁珠抓取的目标细胞因子，形成“三明治”结构，并加入SA-PE偶联上生物素，通过另一束激光照射进行信号放大检测，实现“定量”作用。本panel可检测以下因子：Insulin,Leptin 种属：Rat。液相悬浮芯片应用

流式多因子检测技术(CBA)微球免疫分析系统CBA（CytometricBeadArray）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（captureantibody），与样本（例如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detectionantibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用FCAPArray软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的定性或定量。CBA具有以下优点：每次检测需25-50ul样本；灵敏度可达0.274pg/ml时间t夬速，需3-4小时，快速上样可同时测定30种蛋白，实验可重复性高利用FCAPArray软件，不论样本数目多少，可快速分析完成分析sh800流式细胞分选仪多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。

本panel可检测以下因子：CCL2/JE/MCP-1,CCL3/MIP-1alpha,CCL4/MIP-1beta,CCL5/RANTES,CCL11/Eotaxin,CCL19/MIP-3beta,CCL20/MIP-3alpha,CD40Ligand/TNFSF5,CXCL1/GROalpha/KC/CINC-1,CXCL2/GRObeta/MIP-2/CINC-3,CXCL10/IP-10/CRG-2,EGF,FGFbasic/FGF2/bFGF,Flt-3Ligand/FLT3L,G-CSF,GM-CSF,GranzymeB,IFN-alpha2/IFNA2,IFN-beta,IFN-gamma,IL-1alpha/IL-1F1,IL-1beta/IL-1F2,IL-1ra/IL-1F3,IL-2,IL-3,IL-4,IL-5,IL-6,IL-7,IL-8/CXCL8,IL-9,IL-10,IL-12p70,IL-13,IL-15,IL-17/IL-17A,IL-17E/IL-25,IL-33,Lymphotoxin-alpha/TNF-beta,PD-L1/B7-H1,PDGF-AA,PDGF-AB/BB,TGF-alpha,TNF-alpha,TRAIL/TNFSF10,VEGF种属：Human

抗体芯片技术服务包括：1，样品蛋白质抽提:a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。2，蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育a.细胞因子抗体芯片封闭后加入50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。4，抗体芯片检测5.提供实验报告:包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。本panel可检测以下因子：Troponin I (cardiac),Troponin ITC Complex 种属：Rat。

本panel可检测以下因子：CCL7/MCP-3/MARC,CCL21/6Ckine,CXCL16,IL-15,IL-34,IL-6Ralpha,Lipocalin-2/NGAL,MMP-13,MSP/MST1,Myoglobin,Nectin-4,OncostatinM/OSM,PDGF-DD,ProproteinConvertase9/PCSK9,RAGE/AGER,RBP4/Retinol-BindingProtein4,Resistin,L-Selectin/CD62L,SerpinA4/Kallistatin,SHBG,SOST/Sclerostin,SPARC,Stanniocalcin1/STC-1,TenascinC,TFF3,Thrombospondin-2,TIM-1/KIM-1/HAVCR,TRACP/ /ACP5,TRANCE/TNFSF11/RANKL种属：Human本panel可检测以下因子：Akt (Total),Akt (Ser473) 种属：Human,Mouse,Rat。507抗体芯片

本panel可检测以下因子：Erk (Total),Erk (Thr185/Tyr187) 种属：Human,Mouse,Rat。液相悬浮芯片应用

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、 sma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）Fluid、PeritonealFluid（腹腔液）等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，比较好是4的倍数，否则会造成浪费。液相悬浮芯片应用

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